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胎牛血清中的病毒檢查

更新時(shí)間:2017-10-25  |  點(diǎn)擊率:1768

 胎牛血清是實(shí)驗(yàn)室常用的天然培養(yǎng)基。它富含各種營養(yǎng),但也容易因母牛存在的病毒感染而攜帶有病毒,從而給細(xì)胞培養(yǎng)帶來潛在的干擾。因此,不但要從源頭上保證懷孕的母牛是健康的,沒有各種傳染病(包括沒有瘋牛病疫情),屠宰場需在政府注冊過,而且在胎牛血清的質(zhì)檢中,也要進(jìn)行各種病毒檢查,以保證胎牛血清的品質(zhì)。而胎牛血清的批號(hào),則保證了每個(gè)批次的生產(chǎn)都是可以追溯的。
 

 

在美國,胎牛血清的病毒檢查遵循著9 CFR 113.52 、9 CFR 113.53聯(lián)邦法令,并以獸藥委員會(huì)(CVMP)關(guān)于免疫性獸藥生產(chǎn)中應(yīng)用牛血清的指南文件(EMEA/CVMP/743/00-Rev.2)、藥委員會(huì)(CPMP)關(guān)于生物藥生產(chǎn)中牛血清應(yīng)用指南的文件(EMEA/CPMP/BWP/1793/02)為參考,并在美國藥典(USP)中有所描述。而我國在藥典中目前只有有關(guān)新生牛血清的質(zhì)檢規(guī)定,還沒有胎牛血清的內(nèi)容。
 

 

在USP提到病毒檢查中,建議使用兩種或兩種以上的細(xì)胞系作為檢測細(xì)胞,其中一種細(xì)胞系應(yīng)為牛源。檢測時(shí),添加15%的待測牛血清培養(yǎng)細(xì)胞至少21天,期間細(xì)胞至少傳代兩次。之后觀察是否存在病毒的擴(kuò)增。

      如用顯微鏡觀察是否存在細(xì)胞病變效應(yīng)(例如由牛鼻支氣管炎病毒導(dǎo)致)、細(xì)胞染色和鏡下包涵體檢查、血吸附檢查((牛副流感3型病毒),并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行針對如下病毒的特異性的免疫熒光抗體檢查:

 

Ø牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)

Ø牛細(xì)小病毒

Ø牛腺病毒

Ø牛蘭舌病毒

Ø牛呼吸道合胞病毒

Ø呼腸弧病毒

Ø狂犬病病毒

 

在其他牛血清的應(yīng)用中,可能還需要檢測一些其他的病毒。如:

 

牛赤羽病,牛皰疹病毒1(BHV-1)、副流感-3病毒(PI-3)、牛白血病、牛輪狀病毒、牛圓環(huán)病毒、牛多瘤病毒、冠狀病毒、牛環(huán)曲病毒、牛腸道病毒、牛星狀病毒、口蹄疫病毒(FMDV)、牛瘟病毒。
 

 

總之,確定牛血清沒有病毒感染,無論對于細(xì)胞培養(yǎng),還是疫苗生產(chǎn),都具有非常重要的意義。

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