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支原體常規(guī)PCR檢測試劑盒(經(jīng)典法)(含Taq酶)

更新時間:2020-03-03  |  點擊率:1393

支原體常規(guī)PCR檢測試劑盒(經(jīng)典法)(含Taq酶)

Venor® Gem Classic

 

 

貨號

品名

規(guī)格

價格

11-1025G

支原體常規(guī)PCR檢測試劑盒(經(jīng)典法)(含Taq酶)

Venor® Gem Classic

25/

詢價

11-1050G

50/

詢價

11-1100G

100/

詢價

11-1250G

250/

詢價

 

 

 

特點

1.內(nèi)控對照為獨立包裝,遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。

2.高特異性,僅一條陽性對照條帶,即可涵蓋所有可能感染細胞的支原體物種。操作簡單,

易于觀察。

3. 高靈敏度,若PCR反應(yīng)體系加入10μl樣本,支原體檢測限度為≤5或≤10CFU。

(詳見下文“(2)Venor® Gem Classic Kit 10種常見支原體檢測限“)

4.歐洲藥典要求的26種支原體均可檢出。該試劑盒可檢測出1種脲原體、7種無膽甾原體和85種支原體,與細菌和真核DNA無交叉反應(yīng)。

5.試劑盒內(nèi)包含Taq酶,無需另外購買。

 

Venor® Gem Classic Kit

10種常見支原體檢測限

 

物種

檢測限
[CFU/ml]

物種

檢測限
[CFU/ml]

萊氏無膽甾原體

≤5

肺炎支原體

≤10

豬鼻支原體

≤10

精氨酸支原體

≤10

發(fā)酵支原體

≤10

雞敗血支原體

≤10

口腔支原體

≤10

螺原體

≤10

關(guān)節(jié)液支原體

≤10

唾液支原體

≤10

 

 

操作步驟

1步:樣本處理

a. 細胞培養(yǎng)上清

 

b. 生物藥或需遵循藥典的樣本

說明:①樣品基質(zhì)可能會影響檢測的靈敏度。收集和篩選更高的樣品量可提高測定靈敏度。

   ②細胞培養(yǎng)物樣本含豐富的DNA酶,在低溫下也能降解支原DNA,影響檢測靈敏度。

建議:樣本做DNA抽提處理,實現(xiàn)高靈敏度。

推薦:德國MB公司生產(chǎn)的支原體DNA提取試劑盒Venor® Gem Sample Preparation Kit該DNA抽提試劑盒已經(jīng)過廣泛驗證。

2步:試劑制備

 

3步:PCR體系建立

a. 細胞培養(yǎng)上清

 

b. 生物藥或需遵循藥典的樣本

 

4步:啟動PCR反應(yīng)

 

5步:電泳結(jié)果分析

 

 191bp為內(nèi)控對照條帶,表明PCR反應(yīng)正常。

 

當樣本存在支原體污染時,由于內(nèi)控對照與支原體DNA存在競爭,內(nèi)控對照條帶變?nèi)酰ɡ缰гwDNA>103拷貝)。

陽性對照中支原體DNA>104拷貝,內(nèi)控對照條帶會*消失。

可能在80-90bp存在引物自退火形成的條帶,此條帶不影響檢測結(jié)果。

如果待測樣本對PCR產(chǎn)生抑制,則內(nèi)控對照條帶變?nèi)酰ê完幮詫φ障啾龋?,此時應(yīng)先進行DNA抽提(推薦使用:Venor® Gem Sample Preparation Kit 支原體DNA抽提試劑盒,詳見第25頁),然后再檢測。

 

儲存條件

2~8℃至少6個月。復(fù)溶后在-18℃保存。

 

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