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什么是胎牛血清,血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理

更新時(shí)間:2020-10-16  |  點(diǎn)擊率:2510

血清就是去除了血細(xì)胞和纖維蛋白(用于凝血)的成分之后,剩下的血液中的液體。在細(xì)胞體外培養(yǎng)中常需要添加血清。血清是細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的天然來源,具有許多人工合成的培養(yǎng)基所不具備的營(yíng)養(yǎng)因子。它的應(yīng)用已經(jīng)有了100多年的歷史。那么血清里面含有什么成分呢?

例如《生物制品學(xué)雜志》 1981年第1期第22頁(yè)上就發(fā)表過1篇《血清的性質(zhì):血清成分的分析》文章,作者是Macleod AJ等。這是一篇翻譯。原始出處是AJ Macleod,O Drummond. Serum quality: an analysis of its components. Developments in Biological Standardization.1980,46:17。
該文章開始提到的是蘇格蘭國(guó)立輸血站蛋白分離中心用序貫低溫酒精沉淀法處理人血漿,得到了很多成分(注: 血漿是去除了血細(xì)胞的血液液體,和血清區(qū)別是含有纖維蛋白原),包括凝血因子、纖維蛋白原、免疫球蛋白、白蛋白、a球蛋白和b球蛋白,很多有重要的治療作用。該中心曾在1年中處理了5萬(wàn)升血漿,得到了750kg的血漿蛋白。血漿蛋白中的許多蛋白質(zhì)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)很重要,如銅藍(lán)蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)素(somatomedin),還有一些蛋白酶抑制劑,如a-抗胰蛋白酶、抗凝血酶III和a2-巨球蛋白。
該文還指出,胎牛血清蛋白含量一般低于新生牛或成牛血清。用醋酸纖維素電泳作蛋白成分分析,胎牛血清的白蛋白含量比其他血清高,而球蛋白的含量比其他血清低得多。
注:生長(zhǎng)調(diào)節(jié)素(somatomedin)是過去使用的名字,是一類促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)分裂的物質(zhì)?,F(xiàn)已發(fā)現(xiàn),胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)是生長(zhǎng)調(diào)節(jié)素A,玻連蛋白是生長(zhǎng)調(diào)節(jié)素B,胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-I)稱為生長(zhǎng)調(diào)節(jié)素C。
a1-抗胰蛋白酶:主要由肝臟合成,主要作用是保護(hù)機(jī)體正常細(xì)胞和器官不受蛋白酶的損傷,抑制感染和炎癥,維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的平衡。
a2-巨球蛋白:是血漿中分子量大的蛋白質(zhì)。分子量約為65.2萬(wàn)-80萬(wàn),含糖量約8%,由4個(gè)亞單位組成。它與淋巴網(wǎng)狀系統(tǒng)細(xì)胞的發(fā)育和功能有密切聯(lián)系。
球蛋白主要與機(jī)體免疫功能有關(guān)。
懷孕5-8個(gè)月的母牛被屠宰,發(fā)育未*的牛胚胎心臟穿刺采血獲得。此時(shí)胎牛血中含有特殊的生長(zhǎng)發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育*這些因子自動(dòng)消失。
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但pu遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會(huì)存在于血清中,亦是造成沉淀物的原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。
若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400轉(zhuǎn)/分離心1-2分鐘,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。hao不使用過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過濾膜。在解凍血清時(shí),建議隨時(shí)將血清搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
 

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