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同樣是細(xì)胞被支原體污染,怎么挑選支原體祛除劑

更新時間:2020-11-05  |  點擊率:853

養(yǎng)細(xì)胞時,除了支原體的檢測需要定期進(jìn)行外,支原體的預(yù)防和祛除也是一個重要方面。

 

它包括工作區(qū)域中的支原體的預(yù)防和祛除和培養(yǎng)箱水槽、水浴鍋中預(yù)防支原體的污染。但一旦發(fā)生細(xì)胞培養(yǎng)時有支原體污染,應(yīng)如何挑選支原體祛除劑呢?

這里指的支原體祛除劑,是加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中來發(fā)揮作用。

 

德國MB有三種支原體祛除劑,都是加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中使用。它包括:

 

1. 支原體祛除劑Zell Shield®

它是復(fù)合抗生素成分,抑制支原體蛋白和DNA合成,也抑制細(xì)菌和真菌。

適合細(xì)胞已發(fā)生支原體污染,但又不愿丟棄,希望繼續(xù)培養(yǎng)(如已轉(zhuǎn)染或大量擴增的細(xì)胞)的情況。

使用時需要采用懸浮沖洗法,并連續(xù)培養(yǎng)三代。具體流程如下:

 

據(jù)研究表明,約98%的支原體存在于細(xì)胞表面和細(xì)胞間隙。細(xì)胞傳代時,用干凈的PBS反復(fù)懸浮沖洗,就能把70%以上的支原體沖下來。

 

支原體直徑在180~350nm之間,遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于細(xì)胞直徑。通過低速離心,很容易將細(xì)胞和支原體分離,棄上清即可祛除大部分支原體。

 

2. 支原體祛除劑Mynox® Gold(細(xì)胞保種用)

它含Mynox®和抗生素。Mynox®直接殺滅支原體,而非抑制。它適合珍貴細(xì)胞或不易獲得的生物樣本(如細(xì)胞種子)Mynox® Gold細(xì)胞毒性在5%以下,作用較溫和,細(xì)胞需培養(yǎng)治療4代。它尤其適合原代細(xì)胞和難養(yǎng)細(xì)胞的支原體的祛除。

 

3. 支原體祛除劑Mynox®(珍貴樣本用)

它適合珍貴細(xì)胞、不易獲得的生物樣本或病毒收獲液。

它和Mynox® Gold的區(qū)別是:它所含的Mynox®濃度比Mynox® Gold高,細(xì)胞毒性為5%~80%(具體看細(xì)胞類型),只需治療1次(≤3小時),即可*支原體。它更適合容易生長的細(xì)胞。

 

 

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