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人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)

更新時(shí)間:2020-11-20  |  點(diǎn)擊率:815

人軟骨損傷后,可用軟骨組織工程進(jìn)行軟骨缺損修復(fù)。軟骨可由間充質(zhì)干細(xì)胞分化而來。因而,間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)和分化具有重要作用。

間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)可以2×10的5次方/cm2的密度接種于特定的培養(yǎng)液(低糖DMEM,含15%FBS,100u/L氨卡青霉素,100 mg/L鏈霉素,250 mg/L兩性霉素)中,置于37℃、5%CO2和飽和濕度的孵箱內(nèi)培養(yǎng)。3 天后更換培養(yǎng)液,小心棄去未貼壁細(xì)胞。以后每3天換液一次。

MSC體外擴(kuò)增時(shí),是待細(xì)胞長至鋪滿瓶底80%時(shí),用0.1%胰蛋白酶和0.01% EDTA(1:1)消化傳代,再以(6~8)×103/cm2的密度接種傳代培養(yǎng)。以后各代均以此密度傳代擴(kuò)增。

一些廠家已提供間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,但價(jià)格不菲。也可考慮用質(zhì)量較好的胎牛血清加DMEM進(jìn)行培養(yǎng)。

質(zhì)量較高的胎牛血清會(huì)非常適合干細(xì)胞的培養(yǎng)。它被眾多國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞典藏項(xiàng)目長期選擇。下面這個(gè)品牌的血清供參考。

Ausbian®特級(jí)胎牛血清

Ausbian Fetal Bovine Serum,Sterile

規(guī)格:500ml/瓶    

貨號(hào):VS500T/WS500T

產(chǎn)品描述

Ausbian®特級(jí)胎牛血清是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。此時(shí)胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發(fā)育因子,非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng)。

所有Ausbian®特級(jí)胎牛血清出廠前均應(yīng)經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控,并附有詳細(xì)的《檢測報(bào)告》,檢查指標(biāo)齊全,如理化檢查、外源因子檢查和促細(xì)胞生長能力等。

Ausbian®胎牛血清均在澳洲當(dāng)?shù)卣F醫(yī)部門的監(jiān)督下從注冊的出口屠場采集,符合動(dòng)物協(xié)會(huì)要求。

Ausbian特級(jí)胎牛血清的優(yōu)勢是:

1、精選內(nèi)毒素更低批次(≤3EU/ml),使細(xì)胞更健康,培養(yǎng)更順利。干細(xì)胞對內(nèi)毒素非常敏感,如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時(shí),干細(xì)胞很容易死亡。因此,挑選更低的內(nèi)毒素,是保證實(shí)驗(yàn)順利的第yi步。

2、七次無菌過濾,后三次為0.1 µm無菌過濾處理。

3、進(jìn)行全面的細(xì)菌、真菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測,保證安全性。

4、提供試用服務(wù),養(yǎng)細(xì)胞更放心。

5、每個(gè)批次產(chǎn)量為2000-3000瓶,試用滿意的實(shí)驗(yàn)室批號(hào)優(yōu)先鎖定,保證大多數(shù)項(xiàng)目兩年不需換批次,細(xì)胞試驗(yàn)數(shù)據(jù)穩(wěn)定。

6、每年按序推出多個(gè)新鮮生產(chǎn)批次,平行供應(yīng),倉儲(chǔ)穩(wěn)定。

7、Viansaga的防偽標(biāo)簽,保證不會(huì)有假貨。保證了實(shí)驗(yàn)的順利,也避免了假貨造成的成本損失。

 

總之,胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)成分中占有重要位置,應(yīng)選用質(zhì)量好的胎牛血清,千萬不可圖便宜。

 

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