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定期進行支原體監(jiān)測,避免細胞生長環(huán)境的污染

更新時間:2020-12-03  |  點擊率:745

支原體在光學(xué)顯微鏡下也無法看見,它被稱為小的細菌。但它沒有細胞壁,形態(tài)多樣。它可粘附在細胞表面,汲取細胞培養(yǎng)液和細胞內(nèi)的各種營養(yǎng),嚴重影響細胞代謝和基因表達。

科研中細胞實驗是chang用的科研手段。由于支原體普遍為人體所攜帶,而且容易在空氣中形成氣溶膠,因此在細胞培養(yǎng)時,常規(guī)應(yīng)至少一周檢測一次支原體。

支原體檢測有多種方法,如PCR法(含實時熒光PCR技術(shù))、恒溫擴增法、DNA染色法、培養(yǎng)法、支原體酶檢測法、ELISA法,以及細胞感應(yīng)變色法等。

這些方法各有長短,有的結(jié)果直觀,有的省時,有的精que,有的靈敏度高。因此,這些方法應(yīng)取長補短。

其中,設(shè)計較好的PCR方法能達到10CFU/ml的檢測限,靈敏度優(yōu)于其他方法,故為藥廠所青睞。PCR方法還有內(nèi)控對照,可反映檢測過程是否正常。同時,PCR方法能覆蓋上百種支原體物種,不容易有假陽性和假陰性,操作也較為省事,不用再去培養(yǎng)細胞,因而應(yīng)用較為多見。

有些PCR方法檢測限能達到20個基因組拷貝數(shù)/PCR反應(yīng),也相當靈敏。

Robustness(穩(wěn)定性或耐用性)也是方法評價的指標之一,可反映方法的可靠性和得出結(jié)果的穩(wěn)定性。PCR方法也具有較好的穩(wěn)定性,不受操作過程的因素波動。

PCR檢測細胞上清中的支原體時,只需2ul就可檢測。如果是用于藥廠的放行檢測,則樣本需加10ul。

 

. 支原體檢測試劑盒(PCR)

 

 

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