999国产精品999久久久久久,香港经典a毛片免费观看,国产av在线私拍,97se亚洲国产综合在线

當前位置:首頁  >  技術文章  >  細胞被支原體污染了會有哪些表現(xiàn)

細胞被支原體污染了會有哪些表現(xiàn)

更新時間:2021-12-28  |  點擊率:762

細胞培養(yǎng)被支原體污染是個世界性問題,在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%。支原體是一類無細胞壁,形態(tài)呈高度多形性,為圓形、絲狀或梨形,其直徑僅有0.13~0.18μm,變形能力大,故能通過濾菌器,突出的結構特征是沒有細胞壁,對作用于細胞壁生物合成的抗生素不敏感。研究表明,支原體能耗盡營養(yǎng)物,促進代謝積累,導致pH改變,對細胞造成多種影響,包括生長狀況、生化特性、代謝、免疫、以及細胞存活等多方面的改變,繼而干擾實驗結果,或造成無法解釋的差異。更加不幸的是拯救被感染的細胞幾乎是不可能的。

那如何檢測你的細胞是否收到支原體的入侵呢?下面介紹了幾種檢測方式,或許對你的實驗有用。
分離培養(yǎng)法
分離培養(yǎng)法是支原體檢測的金標方法,其檢測精確度最高。這種方法是從可疑的細胞培養(yǎng)體系中取樣,并接種到最適宜支原體生長的
瓊脂平板上。如果樣本中含有支原體,它們就會在這種瓊脂平板上FENG狂生長,最終形成明顯可見的特征性菌落。分離培養(yǎng)法基本不會出現(xiàn)假陰性結果,因此被譽為支原體檢測金標準。
但是,分離培養(yǎng)法也存在兩個弊端,一是檢測時間太長,支原體要長出明顯克隆至少需要4周時間。二是盡管可以檢測絕大多數(shù)支原體種類,分離培養(yǎng)法也有力所不及的時候,例如支原體M. hyorhinis。

DNA檢測法,也稱直接培養(yǎng)法

將可疑樣品與指示細胞共同培養(yǎng),一般需要幾天時間。DNA檢測所用的指示細胞通常是細胞質(zhì)區(qū)域較大的Vero細胞,如果原樣本中含有支原體,那么當細胞DNA被熒光染料(如Hoechst染料)染色時,就可以在指示細胞的核周圍觀察到熒光斑點或熒光顆粒。
但是這種方法靈敏度太低,當檢測成陽性時,細胞經(jīng)常已經(jīng)嚴重污染。且Hoechst熒光染色:操作復雜,操作不當易造成假陽性或假陰性。
PCR法
市面上有許多商機提供基于PCR的支原體檢測
試劑盒,如GeneCopoeia。這種方法已經(jīng)比較成熟,應用的范圍也較為廣泛。
PCR法采用針對支原體DNA的引物用PCR檢測可疑樣本,其PCR引物可特異擴增支原體基因組中rDNA保守序列,包括所有已知的支原體,及細胞培養(yǎng)過程普遍遇到的種屬,例如M. arginini、M. arthritidis、M. bovis、M. fermentans、M. genitalium、M. hominis、M. hyorhinis、M. neurolyticum、M. orale、M. pirum、M. pneumoniae、M. pulmonis、M. salivarium 和U. urealyticum。在凝膠電泳過程中,支原體DNA會顯示為特異性條帶,以此指示支原體的存在。
PCR法快速,簡便,具有強擴增能力和*的敏感性,可以檢測大多數(shù)支原體,但謹慎起見最好同時使用另一種檢測方法來進行驗證。PCR法檢測支原體只需幾個小時,是最快但也是最不靈敏的支原體檢測方法。
酶學檢測
酶學檢測是將可疑樣本添加到特定底物中,在這一體系內(nèi)支原體的酶可以將ADP轉(zhuǎn)化為ATP,隨后能利用ATP發(fā)光的luciferase酶就可以指示支原體的存在。
最后,建議你進行定期檢測
支原體感染會影響細胞的正常生長,因此對培養(yǎng)細胞定期進行支原體檢測非常重要。一般來說每1至3個月就應該進行一次支原體檢測。將定期支原體檢測常規(guī)化堅持下去,是細胞培養(yǎng)實驗室應對支原體感染的關鍵。

通常來說,被污染的細胞應該丟棄,以避免成為污染源。但對于珍貴的細胞,以往別的品牌的支原體清除劑,其實只是抑制劑,它們抑制支原體的DNA合成和蛋白合成,但無法殺除。Mynox®是市面上一款具有殺滅作用的清除劑。它提取自枯草桿菌,可與支原體膜特異性結合,破壞膜通透性,導致支原體膨脹破裂而死。

555555555555555.png


99国产精品永久免费视频| 国产69精品久久久久人妻| 瑜伽裤国产一区二区三区| 亚洲一区二区三区AV无码| 高H浪荡H人妻绿帽| 国产精品扒开腿做爽爽爽视频| 成人精品视频一区二区三区不卡| 国产欧美日韩综合精品二区 | 午夜无码伦费影视在线观看| 中文无码一区二区三区在线观看| 久久精品国产亚洲av忘忧草18| 国产AV无码专区亚洲AV软件| 国产精品无码一区二区三区| 国产精品扒开腿做爽爽爽视频 | 日本三级欧美三级人妇视频| 亚洲av午夜福利精品一区| 精品国产18久久久久久| 欧美变态口味重另类在线视频| 日本人丰满xxxxhd| 播放灌醉水嫩大学生国内精品| 少妇被爽到高潮动态图| 成熟女人毛片www免费版在线| 无码欧美熟妇人妻影院欧美潘金莲 | 亚洲精品一区二区三区四区五区| 国产精品宅男擼66m3u8| 色欲av亚洲情无码av蜜桃| 野花免费观看高清在线4| 隔壁的少妇2做爰韩国电影| 女人露p毛视频·www| 特级做a爰片毛片免费看| 插我一区二区在线观看| 国产精品国色综合久久| 欧美一区二区三区成人片在线| 成人免费一区二区无码视频| 蜜臀久久精品久久久久酒店| 亚洲AV乱码久久精品蜜桃| 99精品国产兔费观看久久| 亚洲午夜无码av毛片久久| 88国产精品视频一区二区三区| 日本高清一区二区三区| 亚洲AV无码一区二区乱孑伦AS|