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細(xì)胞培養(yǎng)中最重要的步驟——無(wú)菌操作

更新時(shí)間:2021-12-30  |  點(diǎn)擊率:951

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室最常面對(duì)的難題就是:如何保持無(wú)菌。細(xì)胞一旦遭到污染,所有的實(shí)驗(yàn)結(jié)果都會(huì)變得毫無(wú)意義。

結(jié)細(xì)胞污染的主要原因包括:操作技術(shù)不嚴(yán)格、試劑質(zhì)量不達(dá)標(biāo)、大氣中孢子計(jì)數(shù)增加、養(yǎng)箱或操作臺(tái)使用和維護(hù)不當(dāng)?shù)取?/span>

因此,在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,操作者不僅要嚴(yán)格遵守標(biāo)準(zhǔn)的操作程序,同時(shí)還要特別注意新產(chǎn)品、新品牌、以及設(shè)備的清潔維護(hù)。同時(shí),及時(shí)檢測(cè)并鑒定細(xì)胞是否被污染同樣至關(guān)重要。

實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,超凈臺(tái)以紫外燈照射 30 分鐘滅菌,以 70 % ethanol 擦拭無(wú)菌操作臺(tái)面,并開(kāi)啟超凈工作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,避免細(xì)胞間交叉污染。

實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),再次以 70 % ethanol 擦拭無(wú)菌操作臺(tái)面。實(shí)驗(yàn)用品以 70% 乙醇擦拭后才帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在中央無(wú)菌區(qū)域,一般不要再邊緣區(qū)域操作。

試驗(yàn)臺(tái)、超凈臺(tái)、培養(yǎng)箱、液氮罐、移液器、門把手、電話等細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境被支原體污染,可引起細(xì)胞的污染。應(yīng)定期對(duì)工作區(qū)域進(jìn)行消毒。本文締一生物為您分析實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域中支原體祛除的方法。

常用以下三種方法:


Mycoplasma OffTM是一款支原體噴霧劑,用于清除工作區(qū)域中的支原體。它起效快(10秒鐘即起效),安全無(wú)毒,對(duì)細(xì)胞不會(huì)產(chǎn)生不良影響,噴灑后,可再用干凈紙張擦拭即可。對(duì)于工作臺(tái)以及各種細(xì)胞操作的器具表面,均可使用。如果是需要避免沾染液體的電子設(shè)備,可使用Mycoplasma OffTM濕巾擦拭。


細(xì)胞孵箱、水浴鍋等有溫水的地方,也容易滋生支原體、細(xì)菌等。在循環(huán)水中倒入Water ShieldTM(1:200稀釋)即可有效地預(yù)防滋生,效果可持續(xù)1個(gè)月左右。


Mycoplasma OffTM對(duì)許多細(xì)菌、病毒也有預(yù)防和殺滅作用。


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