999国产精品999久久久久久,香港经典a毛片免费观看,国产av在线私拍,97se亚洲国产综合在线

當前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  細胞傳代的相關(guān)知識

細胞傳代的相關(guān)知識

更新時間:2022-06-13  |  點擊率:654

當培養(yǎng)的細胞增殖達到一定密度后,將會出現(xiàn)密度抑制現(xiàn)象,表現(xiàn)為細胞的生長和分裂速度逐漸減慢,甚至停止。此時如果不及時進行分裝再培養(yǎng),即傳代培養(yǎng),細胞將逐漸走向衰老、死亡。將培養(yǎng)的細胞從一個容器以1∶2或其他比率轉(zhuǎn)移到其他容器中擴大培養(yǎng),稱為傳代培養(yǎng)。貼附型生長細胞采用酶消化傳代法,而懸浮型生長細胞則采用直接傳代法或離心傳代法,以下將分別加以介紹。

實驗操作

以貼壁細胞培養(yǎng)為例

1、穿好細胞房專用的實驗服,戴好滅菌手套和口罩。

2、從培養(yǎng)箱中取出細胞培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿(Tip1:一般選擇處于對數(shù)期的細胞),用75%酒精消毒外包裝后轉(zhuǎn)移至到超凈臺中。

3、打開蓋子(Tip2:如果是培養(yǎng)皿,只需打開一個縫隙即可,避免污染),輕輕吸出舊的培養(yǎng)液,加入適量PBS緩沖液洗滌1-2次(Tip3:注意從未培養(yǎng)細胞的側(cè)壁加入,以免沖掉細胞),棄去PBS緩沖液。

4、用移液器加入適量胰酶(Tip4:具體量根據(jù)實驗需要確定,提前將胰酶37℃預(yù)熱,效果更好),蓋好蓋子,“十字"晃動,使胰酶充分接觸細胞。

5、將加入胰酶的細胞培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到倒置顯微鏡載物臺,鏡下觀察細胞消化情況,當細胞變圓且大量脫落時,準備終止消化(Tip5:若初始的細胞密度比較高,加入胰酶后,肉眼也可觀察到細胞脫落,當細胞有一半左右脫落時,即可終止消化,避免反復(fù)將培養(yǎng)皿拿出超凈臺,避免增加污染的風險),用75%的酒精噴灑培養(yǎng)瓶表面,轉(zhuǎn)移到超凈臺。

6、用移液器加入等量含血清培養(yǎng)基,終止消化。移液器充分且柔和地吹打,避免產(chǎn)生氣泡,使細胞*脫落。

7、將培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中混合液體轉(zhuǎn)移至離心管中(離心管規(guī)格根據(jù)實驗需要確定),配平后離心3-5分鐘左右(離心機轉(zhuǎn)速根據(jù)細胞種類而定,常見的有1000-3000rpm/min)。

8、離心好后,用酒精噴壺噴灑離心管表面,轉(zhuǎn)移進超凈臺,打開蓋子,將上清液倒入廢液缸。

9、加入適量體積含血清培養(yǎng)基,用移液器或巴氏吸管輕輕吹打,制成細胞懸液。

10、將細胞懸液分裝進2個(或多個)潔凈滅菌培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,加入適量培養(yǎng)基,蓋好蓋子。

11、將分裝好的培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡載物臺,觀察細胞情況,細胞應(yīng)保證一定數(shù)量,數(shù)量太少會影響生長情況。

12、在培養(yǎng)瓶上做標記,注明傳代時間,細胞種類,操作人員等信息。在放入培養(yǎng)箱之前應(yīng)再次用酒精噴一噴培養(yǎng)瓶表面,然后應(yīng)記得整理操作臺,用75%酒精擦拭超凈臺臺面,清理廢液和垃圾。

Ausbian®特級胎牛血清所有血清出廠前,均經(jīng)過嚴格質(zhì)控,每個批次附有詳細完整的《檢測報告》,包括:品名,貨號,批號,血源地,生產(chǎn)日期,保質(zhì)期,pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、球蛋白、IgG、內(nèi)毒素、無菌檢查(細菌、真菌、支原體)、病毒檢查(如BVD、牛腺病毒、細胞病變效應(yīng)等)、促細胞生長能力、細胞毒性、BVD-1/2抗體檢查等。

實驗人對于新批次血清,應(yīng)認真審閱《檢測報告》,做好試用前篩選第一步。(如何看懂《檢測報告》,可登陸“締一生物"網(wǎng)站,留言技術(shù)部,得到免費幫助。)


它在國內(nèi)市場經(jīng)歷十幾年,被眾多科研工業(yè)客戶反復(fù)選擇,也是細胞典藏等重大項目十幾年的供應(yīng)品牌


菠萝蜜视频免费观看| 国产人妻777人伦精品hd| 国产日韩欧美一区二区东京热| 猫咪av成人永久网站在线观看| 精品人妻一区二区三区四区在线| 无码精品a∨在线观看免费| 女人被狂躁到高潮视频免费软件| 久久久久久久99精品免费观看| 午夜性无码专区| 精品久久人人爽天天玩人人妻 | 国产永久免费crm系统| 国产成人影院一区二区三区| 无码人妻一区二区三区在线视频 | かしこまりました中文在线| 亚洲国产三级在线观看| 欧美性猛交aaaa片黑人| 在线观看国产精品日韩av| 97精品人妻一区二区三区香蕉| 欧美黑人xxxx高潮猛交| 中文字幕人妻中文av不卡专区| 久久久无码精品亚洲日韩| 丝袜 亚洲 另类 欧美 变态| 午夜欧美精品久久久久久久 | 亚洲av不卡无码国产| 中文字幕精品久久久乱码乱码 | 特黄熟妇丰满人妻无码| 中文在线ずっと好きだった| 一区二国产好的精华| 精品一品国产午夜福利视频| 国产99视频精品免视看9| 国产精品久久久久精品综合| 男人边吻奶边挵进去视频网站| 一本色道久久综合亚洲精品| 久久理论片午夜琪琪电影网| 欧美丰满熟妇BBBBBB百度| 女厕精品合集ktv偷窥| 啦啦啦www在线观看| 国产精品 高清 尿 小便 嘘嘘| 亚洲av永久无码国产精品久久 | 亚洲国产精品成人麻豆| 精品久久久久久亚洲综合网|