999国产精品999久久久久久,香港经典a毛片免费观看,国产av在线私拍,97se亚洲国产综合在线

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  你知道細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟都有哪幾步嗎?

你知道細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟都有哪幾步嗎?

更新時(shí)間:2022-07-22  |  點(diǎn)擊率:785

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指的是細(xì)胞在體外條件下的生長(zhǎng),在培養(yǎng)的過程中細(xì)胞不再形成組織(動(dòng)物)。培養(yǎng)物是單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞群。細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)都要生活在人工環(huán)境中,由于環(huán)境的改變,細(xì)胞的移動(dòng)或受一些其他因素的影響,培養(yǎng)時(shí)間加長(zhǎng),傳代導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)單一化型。

一、細(xì)胞復(fù)蘇

將凍存細(xì)2113胞從液氮5261中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融4102化。移人15ml離心管中,加入10ml預(yù)熱1653的DMEM*培養(yǎng)基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。

加入10mlDMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入10mlDMEM*培養(yǎng)基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

二、細(xì)胞傳代

細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí).去培養(yǎng)基,10mlPBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人細(xì)胞培養(yǎng)箱3min。加人1mlDMEM*培養(yǎng)基終止胰酶消化,轉(zhuǎn)移至15ml離心管。

加入10mlPBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)盤,轉(zhuǎn)移至15ml離心管,2000rpmX2min,棄上清液。再加入10mlPBS(經(jīng)高壓滅菌,保存于40C),吹勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),按照1×106/盤接種,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

三、細(xì)胞凍存

細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去培養(yǎng)基,10mlPBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人細(xì)胞培養(yǎng)箱3min。加入lmlDMEM*培養(yǎng)基終止胰酶消化,轉(zhuǎn)移至15ml離心管。加入10mlPBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)盤,轉(zhuǎn)移至15ml離心管,2000rpmX2min,棄上清液。

加入lml凍存液(90%血清,10%DMSO),放入凍存盒內(nèi)(盒內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入一80℃冰箱內(nèi),過夜,第二天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個(gè)月。

凍存液的配制:70%的*培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加,邊滴邊搖。


科研實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是一個(gè)重要環(huán)節(jié)。細(xì)胞要養(yǎng)好,就要用好血清,如Ausbian®特級(jí)胎牛血清,它適合各種細(xì)胞培養(yǎng),尤其適合難養(yǎng)細(xì)胞,如:干細(xì)胞、肝細(xì)胞,神經(jīng)細(xì)胞,原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、轉(zhuǎn)染細(xì)胞等。


国产真实乱人偷精品人妻| a级毛片免费观看在线播放| 欧美老熟妇乱XXXXX| 美腿丝袜视频| 久久久99久久久国产自输拍| 中文字幕久久久久人妻中出| 人妻系列无码专区久久五月天| 亚洲欧洲精品a片久久99| 少妇spa推油被扣高潮| 国产精品三级一区二区| julia无码中文字幕在线视频| 久久久国产精品免费a片分环卫| 国产私人尤物无码不卡| 熟妇人妻无码XXX视频| 日本伊人精品一区二区三区| 国产欧美一区二区精品性色| 无码欧美多人性站交大战| 欧美疯狂性受XXXXX另类| 中文字幕日本人妻久久久免费 | 日本妞XXXXXXXXX68| 亚洲 都市 校园 激情 另类| 成人片黄网站色大片免费| 蜜臀av免费一区二区三区| 善良的嫂子在线观看| 无码专区AAAAAA免费视频| 亚洲国产成人久久精品| 亚洲av色香蕉一区二区三区| 护士奶头又白又大又好摸视频| 又大又粗又爽免费视频a片| 99久久久无码国产精品6| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 日韩AV无码AV免费AV不卡| 精品日本一区二区三区在线观看| 老旺的大肉蟒进进出出次视频| 日韩性做爰免费a片aa片| 亚洲av成人片无码| 少妇做爰免费视频网站| 无码人妻精品一区二区三区99| 一区二区狠狠色丁香久久婷婷| 亚洲综合伊人久久综合| 国产老熟女视频一区二区|