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保障細胞培養(yǎng)實驗順的關(guān)鍵要點:如何進行前期準備

更新時間:2023-09-25  |  點擊率:497

工欲善其事,必先利其器。想要做好細胞實驗,前期的準備很重要。

 

1、選擇正確的培養(yǎng)基

 

在養(yǎng)細胞之前,就要了解,你所養(yǎng)細胞的來源以及種類和名稱。

 

選擇正規(guī)途徑來源的細胞,索取細胞培養(yǎng)條件,并查閱文獻,確定所需培養(yǎng)液種類以及是否需要添加特殊成分,常用的細胞培養(yǎng)液有DMEM、RPMI1640、F12等等,一些常見的細胞基本可以使用這幾種培養(yǎng)基中的一種來培養(yǎng),有的需要加入一定其他成分,這需要根據(jù)不同的細胞類型,查ATCC細胞庫或者查文獻,才能找到所需最佳培養(yǎng)液。選擇正確的培養(yǎng)液是養(yǎng)好細胞的第一步。

 

2、了解細胞的生長習性

 

不同的細胞生長習性不同。如成纖維細胞是貼壁生長,有一定的密度依賴性,密度小可能會出現(xiàn)不增殖,狀態(tài)差的情況,接種密度大時則需要隔天傳代,頻繁傳代則影響細胞狀態(tài);再如RPMI-8226人多發(fā)性骨髓瘤細胞,是懸浮生長的,傳代需離心棄去上清即可??傊私饧毎L習性,再加上正確的計數(shù),才能掌握好傳代的密度。

 

3、準備無菌環(huán)境

 

千里之堤潰于蟻穴,細菌、真菌、支原體等微生物的生長速度塊和破壞力強,會破壞細胞結(jié)構(gòu),影響實驗結(jié)果。使用紫外線照射、定期用專用試劑進行實驗室清潔等,都有助于降低細胞污染的風險。

 

4、選擇優(yōu)質(zhì)的血清

 

血清中含有細胞生長所必須的生長因子,作為哺乳動物細胞培養(yǎng)的附加物,血清的添加是十分重要的,因此,選擇優(yōu)質(zhì)的血清,是細胞培養(yǎng)成功與否的關(guān)鍵!Ausbian進口胎牛血清,內(nèi)毒素含量低,澳洲血源,全程冷鏈運輸,為細胞培養(yǎng)保駕護航。

 


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