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胎牛血清品質(zhì)如何對細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生不同的影響?

更新時(shí)間:2023-10-11  |  點(diǎn)擊率:500

體外研究是減少動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本工具,具有廣泛的應(yīng)用,包括疾病建模(如衰老和癌癥)、組織再生、基因治療、藥物開發(fā)和疫苗生產(chǎn)。此外,近幾年來,體外三維(3D)培養(yǎng)的建立,如球體和類器官的出現(xiàn),提供了更強(qiáng)大和可靠的人體組織模型。因此,3d培養(yǎng)是未來取代動(dòng)物模型的一種很有前景的策略。然而,細(xì)胞培養(yǎng)及相關(guān)技術(shù),包括3d培養(yǎng)和生物打印,通常依賴于動(dòng)物源性產(chǎn)品,如FBS、胰蛋白酶、膠原蛋白、明膠等。

 

FBS被認(rèn)為是培養(yǎng)基的通用補(bǔ)充劑,因?yàn)樗慕M成包括激素、維生素、轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和促進(jìn)細(xì)胞粘附、增殖和代謝的生長因子。

 

FBS在細(xì)胞生長培養(yǎng)基中的濃度根據(jù)細(xì)胞類型從2%20%不等,常用的添加濃度是10%,FBS可以影響細(xì)胞增殖。

 

例如,研究表明,人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BM - MSCs)的增殖與培養(yǎng)基中FBS的百分比成正比。當(dāng)FBS濃度從5%增加到20%時(shí),BM - MSC增殖呈濃度依賴性增加。另一方面,免疫抑制分子,如白細(xì)胞介素10和吲哚胺2,3雙加氧酶1,在7%10%FBS中產(chǎn)量比較好,而在5%20%FBS中產(chǎn)量減少,因此強(qiáng)調(diào)了根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇正確的FBS濃度來維持培養(yǎng)中的MSC的重要性。有趣的是,正如Abbasalipour等人所證明的那樣,FBS還可以提高細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)的效率。他們發(fā)現(xiàn),在細(xì)胞接種前用FBS包被的板增加了附著的K562細(xì)胞(人淋巴母細(xì)胞)的數(shù)量,并且與未包被的條件相比,慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率提高了。FBS也被廣泛用作細(xì)胞遷移試驗(yàn)中的化學(xué)引誘劑。

 

在細(xì)胞培養(yǎng)中使用FBS存在與污染物相關(guān)的缺點(diǎn),如內(nèi)毒素、支原體、病毒和朊病毒蛋白,但也由于不同批次的未定義成分。為了證明這一點(diǎn),來自不同制造商的三批FBS被證明對成人培養(yǎng)的色素視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞的生長有不同的促進(jìn)作用。通過蛋白質(zhì)組學(xué)分析,發(fā)現(xiàn)促生長能力最高的FBS批次含有其他兩個(gè)批次未檢測到的生長因子和蛋白質(zhì),如轉(zhuǎn)化生長因子β1 (TGF‐β1)、膠質(zhì)生長因子和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4。不同季節(jié)獲得的血清批次質(zhì)量的變化也會(huì)通過改變細(xì)胞生長、活力和形態(tài)影響實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性。

 

綜上所述,在進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí),需要嚴(yán)格挑選高品質(zhì)的胎牛血清。選購時(shí),需關(guān)注內(nèi)毒素、微生物檢測、相關(guān)蛋白檢測等指標(biāo),還應(yīng)關(guān)注批次庫存等情況。

Ausbian進(jìn)口胎牛血清,澳洲血源,多批次平行供應(yīng),購買前提供不同批次試用服務(wù),且血清內(nèi)毒素含量低,各項(xiàng)微生物檢測均合格。


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