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如何通過實驗判斷血清是否符合實驗需求?貼壁效應可供參考

更新時間:2023-10-14  |  點擊率:474

是細胞培養(yǎng)中重要的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng)。實驗中較為常用的是牛血清。根據(jù)血液來源的不同,牛血清可分為:胎牛血清,新生牛血清,小牛血清,成牛血清等。

【胎牛血清】(Foetal Bovine Serum,簡稱FBS):是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發(fā)育因子,非常適合各種細胞的培養(yǎng),一旦胚胎發(fā)育結(jié)束這些因子自動消失。因此8個月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來使用。

【新生牛血清】(Newborn Calf Serum,簡稱NBCS):0—7天內(nèi)(也有說法是0—30天內(nèi));

【小牛血清】(Calf Serum):采自出生30——1年的小牛。

【成牛血清】(Adult Bovine Serum,簡稱ABS):采自成年牛收全血后分離得到血清。

血清在細胞培養(yǎng)過程中的作用,可大致歸為以下幾點:

1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。

2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。

4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。

5.起酸堿度緩沖液作用。

6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。

7.參與細胞凍存。

 

是許多重組蛋白及藥物生產(chǎn)和研發(fā)用細胞培養(yǎng)基中的關鍵成分,對細胞生長的需要仍難以大規(guī)模的用其它物質(zhì)所代替。研究表明,細胞通過其粘附蛋白包括纖維連接蛋白(Fibronectin,Fn)和體外連接蛋白(Vitronectin,Vn)吸附在人工材料的培養(yǎng)皿上。不同比例的白蛋白和胎牛血清混合溶液等復雜介質(zhì)對FnVn通過培養(yǎng)皿表面自組裝單分子膜對細胞粘附的作用有較大差異。不同胎牛血清的細胞粘附相關因子之間的差異所致,胎牛血清的細胞粘附效應可能是影響貼壁細胞生長、分化、繁殖及凋亡等生命活動的關鍵因素。

 

因此實驗室中,可以通過對比添加不同血清的的培養(yǎng)液,對于細胞貼壁的促進作用,來初步判斷血清是否符合實驗需要。在實驗過程中,可以用貼壁的細胞密度,作為評判標準。


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