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合成人工染色體的研究新進展,Lab Clean助力分子生物學(xué)研究

更新時間:2024-03-28  |  點擊率:368

污染的DNARNADNA酶、RNA酶對于采用高靈敏PCR技術(shù)的實驗室來說,并非小問題。最初來自氣溶膠的DNARNA片段,可導(dǎo)致樣品間的交叉污染,造成結(jié)果不準確和假陽性。然而,來自樣品、PCR管、吸頭、移液器和設(shè)備的DNARNA沒有得到重視,直到在PCR中發(fā)現(xiàn)污染。因此,有必要采用有效的Lab Clean™,對實驗室設(shè)備、任何表面和地面進行清潔,以避免污染擴散,以獲得可靠的實驗結(jié)果。

 

長期以來,細菌和酵母中的人工染色體一直是合成生物學(xué)家用來編寫和重寫基因組的載體。哺乳動物系統(tǒng)受限于有限的染色體工具。在人類人工染色體(HACs)被開發(fā)出來的四分之一個世紀之后,科研人員開發(fā)了一種不受控制的多聚化的解決方案,這種解決方案伴隨著先前的版本。它們的HAC約為750千堿基,比以前的HAC大得多,足以容納通過細胞分裂遺傳所需的著絲粒上的多域染色質(zhì)。隨著細胞傳遞方法的簡化,這些發(fā)展為推進哺乳動物和許多其他真核生物的染色體工程提供了手段。

 

相關(guān)研究發(fā)表在《Nature》上,文章標題為:“Efficient formation of single-copy human artificial chromosomes"。

 

大型DNA組裝方法是合成原核生物和芽殖酵母染色體的里程碑式成就的基礎(chǔ)。出芽酵母通過約125堿基對DNA序列定義的著絲??刂迫旧w遺傳,而哺乳動物和許多其他真核生物則使用較大的表觀遺傳著絲粒。利用著絲粒表觀遺傳學(xué)允許人類人工染色體(HAC)的形成,但不足以避免初始DNA分子在引入細胞后猖獗的多聚化。我們描述了一種有效地形成單副本HACs的方法。它采用了一個約750千堿基的結(jié)構(gòu),這個結(jié)構(gòu)足夠大,可以容納存在于內(nèi)部和外部著絲粒上的不同染色質(zhì)類型,從而避免了多聚化的需要。通過使用酵母球質(zhì)體融合,使哺乳動物細胞的遞送流線型。這些進展允許在后生動物細胞的背景下進行忠實的染色體工程。


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