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如何正確試用胎牛血清

更新時(shí)間:2021-01-20  |  點(diǎn)擊率:789

【胎牛血清】是細(xì)胞培養(yǎng)中重要的天然培養(yǎng)基。

它是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。此時(shí)胎牛各臟器正處生長(zhǎng)分化階段,血中含有豐富的生長(zhǎng)發(fā)育因子,非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng)。

因此,如何在使用過(guò)程中保護(hù)這些因子的活性,達(dá)到大的細(xì)胞培養(yǎng)效果,就需要正確地使用胎牛血清。

正確地使用胎牛血清可分為以下四個(gè)方面:

1. 正確儲(chǔ)存,避免反復(fù)凍融

1) 血清在-20°C凍存。

2) 血清避免反復(fù)凍融,以免降低因子活性。如一次用不完,應(yīng)進(jìn)行分裝。

3) 血清和培養(yǎng)基應(yīng)盡可能“現(xiàn)用現(xiàn)配”,配好的培養(yǎng)液,應(yīng)于一周內(nèi)用完。

4) 血清避免在4°C或更高溫度靜置過(guò)久,否則會(huì)破壞血清中有效活性成分,影響血清品質(zhì)。

 

 

2. 正確的融化

上流行的【血清融化三步法】可大限度地保存血清中因子的活性,不會(huì)產(chǎn)生沉淀,同時(shí)能縮短血清融化時(shí)間。具體如下:

 
 

 

3. 關(guān)于胎牛血清的滅活

真正的胎牛血清因?yàn)樘ヅ](méi)有形成有效補(bǔ)體,如果針對(duì)補(bǔ)體滅活的話(huà),就不需要。其他情況根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)來(lái)決定。

 

4. 胎牛血清的濃度

胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,混合后配成*培養(yǎng)基。

曾有文獻(xiàn)報(bào)道,不同胎牛血清濃度對(duì)細(xì)胞存在一定的影響,尤其是干細(xì)胞和原代細(xì)胞。具體濃度需要用戶(hù)根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)來(lái)確定,以既保證培養(yǎng)的效果,又避免血清的浪費(fèi)。

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